BiTE,全称是Bispecific T cell Engager,双特异性T细胞结合器,也称为双特异性抗体。BiTE的组成是将某种肿瘤抗原的抗体识别区序列(anti-TAA scFv)与CD3ε链单克隆抗体的抗原识别区(anti-CD3 scFv)在通过接头肽(Linker)串联而成,在T细胞和肿瘤之间起“桥梁”作用,介导 T细胞靶向识别并特异性杀伤肿瘤细胞。该杀伤作用起效快,效果显著。
Vigen拥有自己独的立BiTE研发平台,已经筛选、验证了靶向多种肿瘤相关抗原(TAA)的单链抗体抗体(scFv)序列。效应细胞除了人(h)的T细胞(BiTE)外还有NK细胞(BiNKE)以及小鼠(m)T的细胞(BiTE),为细胞治疗研究人员提供多样化选择。目前,Vigen已经分别将BiTE(h),BiNKE(h),BiTE(m)基因克隆于慢病毒载体和逆转录病毒载体,公司提供现货质粒、假病毒滴度液以及稳转细胞株产品。Vigen也为客户提供相关的定制化服务。
此外,Vigen具有完善的BiT E体内、体外功能研究平台和技术体系,包括:
1)肿瘤细胞标记荧光素酶检测BiTE的杀伤能力;
2)ELISA检测细胞因子分泌评估效应细胞活化水平;
3)qPCR和流式细胞术分析T细胞分型与耗竭表等指标;
4)免疫缺陷小鼠的BiTE/BiNKE体内药效学分析平台;
5)免疫健全小鼠的BimTE体内药效学分析平台。
案例:GD2 BiTE介PBMC细胞靶向杀伤GD2阳性肿瘤细胞
A:GD2 X CD3 BiTE慢病毒载体构建示意图
B:GD2 X CD3 BiTE介导T细胞对JF-1细胞的杀伤作用分析
GD2高表达细胞株JF-1分别转到Lenti-GFP对照慢病毒和Lenti-GD2XCD3-GFP慢病毒,构建稳转细胞株,然后分别与T细胞共培养24hr或48hr,荧光显微下拍照分析杀伤效果。