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人源CAR-T细胞

 

       CAR-T,全称是Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy,嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)是将某种肿瘤抗原的抗体识别区序列与CD3ζ链或FcεRIγ的胞内区编码序列在体外串联后,通过基因转导的方法转染T细胞,使其表面表达嵌合抗原受体(CAR)。T细胞被“重编码”后,生成大量肿瘤特异性的CAR-T细胞。

       维根生物拥有自己独立的抗体研发平台、分子生物学平台、病毒生产平台以及细胞生物学功能研究平台。公司已经筛选、验证了靶向多种肿瘤相关抗原(TAA)的单链抗体抗体(scFv)序列(见左侧栏),并构建了含有不同胞内结构域的CAR系列产品(见下图),为细胞治疗研究人员提供多样化选择。此外,维根生物还通过多种方式对CAR结构进行改造以增加其有效性和安全性,例如选择短的的胞外结构域(short Hinge,SH)增强CAR的杀伤作用,添加可诱导的caspase-9(iCas9)作为安全开关,添加非免疫原性标签以方便CAR表达检测;利用不同的共刺激域来调节CAR的功能反应等。

 

 

       维根生物开发的科研型Lenti-CAR系列产品,该系列产品采用独立的EF1a启动表达GFP基因,CMV启动子表达CAR基因,便于通过荧光显微镜或流式细胞仪检测慢病毒转导率,同时避免GFP对CAR表达水平产生影响。

       维根生物具有慢病毒和逆转录病毒两套CAR-T细胞制备体系,均生产出具有高滴度、高纯度、无支原体污染的CAR假病毒滴度液。利用维根生物生产的CAR病毒液可以获得高达90%的阳性转导率。目前,维根生物具有下表所示的靶向40余种不同靶点的慢病毒和逆转录病毒CAR载体。

 

不同靶点CAR列表

TAA靶点

慢病毒CAR

逆转录病毒CAR

靶点高表达细胞株

CD19

CD20

CD22

CD30

CD33

CD34

CD38

CD47

CD70

CD87

CD123

CD133

CD138

CD174

x

x

x

CD213a

CD248/TEM1

CD274

CD276/B7-H3

CD317

BCMA

CEA

cMet

CSF1R

CSPG4

EGFR

EGFRvIII

EpCAM

EphA2

FAP

GD2

GPC3

GPMNB

HER2

LAMP1

MSLN

Muc1

Muc16

x

x

x

PSCA

PSMA

TEM8

 

       此外,维根生物具有完善的CAR-T细胞体内、体外功能研究平台和技术体系,包括:

      1)肿瘤细胞标记荧光素酶检测CAR-T细胞杀伤能力;

      2)流式细胞术分析CAR表达率和T细胞杀伤后表型变化;

      3)ELISA检测细胞因子分泌检测CAR-T细胞活化水平;

      4)qPCR和流式细胞术分析T细胞耗竭表型;

      5)免疫缺陷小鼠的CAR-T细胞体内药效学分析平台;

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